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Die Wirussologitscheski Methoden der Forschung bei den Seuchen

Die Wirussologitscheski Forschungen in der Klinik der Seuchen gewinnen der immer größere Wert, was von der Größe des Anteiles der Infektionen der Virusnatur in erster Linie bedingt ist, deren Klinik nicht immer typisch ist. Gleichzeitig sind die schnellen und sicheren Methoden wirussologitscheskoj der Diagnostik nicht für alle Seuchen entwickelt, viele ihnen sind arbeitsintensiv, für ihre Durchführung sind die speziellen Bedingungen, die Versuchstiere, die Nährböden und das vorbereitete Personal nötig. Zur Zeit verwenden für die Diagnostik der Virusinfektionen 3 Hauptspeziese der Forschung.
1. Die mikroskopische Forschung des ansteckenden Materials zwecks der Aufspürung des viralen Antigenes oder patognomonitschnych der Veränderungen in den Texturen. In den diagnostischen Zielen wird die gerade mikroskopische Forschung des infektiösen Materials von den Patientinnen bei der begrenzten Zahl der Virusinfektionen (die Tollwut, dem Chickenpox, dem Gelbfieber, den Herpes u.a.) verwendet. Mehr hat die breite Anwendung die Methode bekommen, die auf dem Entdecken des viralen Antigenes mit der Hilfe fluoreszirujuschtschich die Abwehrstoffe gegründet ist. Die Methode der Immunofluoreszenz kann glaubwürdig nur bei der deutlichen Ausführung aller technischen Forderungen sein.
2. Die Wirussologitscheski Methoden.
3. Die Serologitscheski Forschungen für die Bestimmung der Zunahme des Antikörpertiters in der Dynamik der Krankheit. Die Serologitscheski Methoden der Forschung sind in den labormässigen Bedingungen zugänglicher.
Für diese Forschungen ist die Entnahme des Blutserums in der scharfen Periode der Krankheit und in der Periode rekonwaleszenzii (die paarigen Seren) notwendig. Die Proben des Blutes für serologitscheskich der Forschungen übernehmen steril ohne Antikoagulanzien und die Konservierungsmittel.
Die Hauptetappen wirussologitscheskich der Forschungen die Absonderung der Viren, ihre Gleichsetzung, sind die Charakteristik der biologischen Haupteigenschaften. Für die Absonderung verschiedener Gruppen der Viren zur Zeit existiert die einheitliche Methodik nicht. Es ist von der Mannigfaltigkeit ihrer Eigenschaften und den Besonderheiten der Pflege außer dem Organismus des Wirtes in erster Linie bedingt. Für die Forschung verwenden die Biosubstrate (das Abspülen von der Schleimhäute, das Blut und ihre Komponenten, spinnomosgowaja den Liquor, den Urin und die Kotabgänge, die Biopsieproben der Organe und der Texturen oder ihre Stückchen, die bei der Obduktion) genommen sind, die die spezielle Bearbeitung mit nachfolgend passirowanijem des Materials unterziehen. Das für die Forschung genommene Material soll bei der Temperatur von—20 °s bis zu—70 °s bewahrt werden. Je nach der vorläufigen Diagnose hat die Bearbeitung des Materials die Besonderheiten, aber für alle Fälle wird das Erhalten des Substrates, der maximal von den Beimischungen des Schleimes gereinigt ist, der Käfige der Organe und der Texturen oder ihrer Fragmente, der Bakterien angenommen. Es wird von der Homogenisierung des untersuchten Materials im speziellen Apparat oder der Abreibung im Porzellanmörser auf der Kälte mit dem Quarzglas (die Stückchen der Organe und der Texturen) mit der Ergänzung steril gekühlt (+4) 0,9 % erreicht

Der Lösung des Chlorids des Natriums bis zum Erhalten 10—30 % suspensii und nachfolgend zentrifugirowanijem bei 1500—3000 U/min im Laufe von 10—15 Minuten Bekommen so nadossadotschnuju den Liquor verwenden für die Durchführung der weiteren Forschungen.
Bis zur intensiven Entwicklung und dem Einbruch in die breite Praxis der Methode der Kultur der Texturen und der Käfige wurde die Ansteckung der Versuchstiere oder der Embryos des Huhns verwendet. Diese Methoden werden und zur Zeit verwendet. Die Aufspürung der Viren unter Ausnutzung der Tiere ist für jene Fälle am meisten zweckmässig, wenn es gelingt, im Experiment das typische Bild der Infektionskrankheit oder seine abgesonderten Erscheinungsformen wiederzugeben. So können die Erreger der Gruppe der Arboviren und Koksaki bei der Ansteckung ins Gehirn der Mäuse-Säuglinge, der Influenza — bei der Ansteckung der Hühnerembryos oder intranasalnom die Einführung des untersuchten Materials den Mäusen enthüllt sein. In wirussologitscheskich die Labore in die letzten Jahre fingen am breitesten an, die Methode der Kultur der Käfige und der Texturen, zulassend zu verwenden, die adenoassoziierten Viren, die Herpese-Viren abzuscheiden, es ist der Virus, miksowirussy und andere und schon in den ersten Etappen der Forschung respiratorisch-sinzitialnyj, etiologitscheskuju die Diagnostik der Erkrankung zu verwirklichen. Gründung sind die gut studierten zytologischen Besonderheiten der Zusammenwirkung der Mehrheit der Viren und der Käfige dazu. So bringt die Ansteckung der Käfige HeLa, Ner-2 vom Material, das das adenoassoziierte Virus des 2. Typs enthält, zur Veränderung des Charakters der Größe der Zellmonoschicht und zum Erscheinen der typischen Käfige in Form von den Weintrauben usw., gut bestimmt im gewöhnlichen Lichtmikroskop bei der kleinen Vergrößerung schon auf die 3. Tage.
Den Ausnahmewert für etiologitscheskoj der Diagnostik der Infektionskrankheit hat die Standardisierung der Absonderung des Virus aus dem untersuchten Material, dass in der gegebenen Arbeitsstufe die Nutzung genetisch der reinen linearen Tiere unter Berücksichtigung ihrer fenotipitscheskich (in erster Linie Alters-) der Besonderheiten vermutet. Es ist vor allem davon bedingt, dass die Versuchstiere verschiedener genetischer Linien und des Alters in verschiedener Stufe für die Viren empfänglich sind. So hat sich bei intrazerebralnom die Ansteckung der Mäuse nejrotropnym vom Stamm WSN des Grippevirus bei den tierischen Linien BALB/c, A, CBA und nicht reinrassig die Sensibilität meist erwiesen, solche Gesetzmäßigkeit ist und für die Fälle intranasalnogo die Einführungen des untersuchten Materials bestimmt. Der wesentliche Wert für die Endergebnisse der Arbeit nach der Absonderung der Viren hat die vorläufige Untersuchung der tierischen Hühnerembryos, der Kulturen der Käfige und der Texturen hinsichtlich latent wirussonossitelstwa. Die in der labormässigen Praxis sehr breit verwendeten Hühnerembryos können von den Leukoviren der Vögel, der Vogelenzephalomyelitis, infektiös sinussita, psittakosa, der Krankheit Newcastles, den Erregern einiger bakterieller Infektionen (paratify u.a.), sowie mikoplasmoj verseucht sein. Noch bolscheje die Zahl der bakteriellen und besonders Virusagenten fähig spontan, die Kultur der Käfige und der Texturen anzustecken und in ihnen zu erleben. Ihre Anwesenheit beeinflusst die Einschätzung des untersuchten Materials wesentlich. Einige Speziese mikoplasm in der Kultur der Käfige
Können die Hämagglutination und die Hämadsorption und sogar bedingen, unter agarowym von der Deckung der Platten, die mit obrasujemymi die Viren ähnlich sind zu bilden. Der nicht unwesentliche Wert hat auch die Verschmutzung der Zellkulturen eines Typs von anderem, es ist es am oftesten es kommt vor es ist mit den Käfigen HeLa verbunden und wird bei der Arbeit mit verschiedenen Typen der Kulturen in einem Zimmer beobachtet, bei der schlechten Bearbeitung des labormässigen Geschirrs u.a. wird das Vorhandensein der Kontamination der Zellkulturen oder die Ansteckung der Tiere von den bakteriellen Agenten genug deutlich (die Veränderung des Charakters der Größe der Monoschicht der Käfige, der Eigenschaften kulturalnoj die Mittwoche, den Niedergang der Hühnerembryos oder der Tiere mit einer bestimmten Symptomatologie usw.) in der Regel gezeigt und die besonderen Schwierigkeiten bei der Einschätzung der Ergebnisse stellt nicht vor. Komplizierter verhält sich die Frage mit den latenten Formen der Infektion, wo die Anwendung serologitscheskich und anderer Methoden gefordert wird. Diese Hinweise sollen in der Arbeit des Arztes-Virusforschers, besonders bei der Durchführung etiologitscheskoj der Diagnostik der unklaren Fälle der Erkrankung berücksichtigt werden.

 
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